一、产品介绍

尊龙凯时提供的永生化小鼠肝枯否细胞（Kupffer细胞）是一种高效且可靠的体外实验模型，广泛使用于肝脏炎症反应和肝脏疾病的病理机制研究。以下是我们基于该产品所开展的一项应用案例分享。

二、实验方法

我们从尊龙凯时收到的永生化小鼠肝枯否细胞在含有10%胎牛血清、1%青霉素和链霉素的DMEM培养基中，于37°C和5% CO₂培养箱中进行培养。细胞达到80-90%汇合时，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化，然后按1:4的比例进行传代。实验中所用药物以DMSO为溶剂，制备成不同浓度的储存液，置于-20°C保存。

细胞被接种于96孔板中，每孔约接种5×10³个细胞。经过24小时培养后，移除培养基并加入含不同浓度药物的新鲜培养基。药物处理分为对照组（仅含DMSO）和实验组（不同浓度的药物），每组设6个重复孔。药物处理24小时后，向每孔中加入20µL的5mg/mL MTT溶液，再在培养箱中继续培养4小时。

随后，移除MTT溶液并向每孔中添加150µL DMSO，震荡10分钟以溶解甲臜晶体。使用酶标仪在570nm波长下测量吸光度（OD值）。药物处理24小时后，收集细胞培养上清液，按照ELISA试剂盒的说明书进行操作，测定上清液中TNF-α和IL-6的含量。数据分析使用GraphPad Prism软件完成，组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）后进行Tukey's多重比较检验。所有数据以平均值±标准差（SD）表示，P值小于0.05视为具有统计学意义。所有实验至少重复三次以确保结果的可靠性。

三、实验结果

在我们实施的实验中，与对照组相比，药物处理的永生化小鼠肝枯否细胞在实验组中显示出显著降低的细胞活力（P<0.05）以及增加的TNF-α和IL-6水平（P<0.05），提示该药物可能具有抗炎作用。

四、结语

尊龙凯时的永生化小鼠肝枯否细胞为肝脏炎症研究提供了稳定且可靠的实验工具。我们的应用案例表明，该产品在药物筛选及炎症机制研究中发挥了重要作用。我们期待与广大科研工作者合作，共同推动肝脏疾病研究领域的进展。

参考文献：