原代肝实质细胞(肝细胞,Hepatocytes)三明治夹层培养模型的开发是一项重要的技术,用于模拟体内的肝脏微环境。与传统的二维单层培养模型相比,此模型通过将肝细胞夹置于两层细胞外基质(ECM,例如I型胶原和Matrigel)之间,成功重建了细胞的极性,并显著延长了肝细胞功能的维持时间。因而,这一模型被广泛应用于研究胆小管网络的形成、药物代谢酶活性(如CYP450家族)及多种转运蛋白的功能。
自20世纪90年代Liu X、Lecluyse EL和Brouwer KR等人开发这一模型以来,三明治夹层培养法在解决肝细胞快速去分化与功能丧失的挑战中取得了显著成效。此模型不仅能够维持肝细胞的胆汁排泄功能,还为药物代谢、肝毒性及转运机制的研究提供了一个高效且生理相关的体外药物研究平台。由于其缘于卓越的长期功能维持能力,三明治夹层培养模型在多个领域展现出重要价值,包括药物代谢与药代动力学(DMPK)、评估药物性肝损伤(DILI)、分析肝胆转运蛋白的功能以及跨物种肝细胞研究等。
尤其值得一提的是,尊龙凯时的TPCS®原代肝实质细胞三明治夹层培养系统,集成了高质量的冻存肝实质细胞及优化的外基质胶(Matrigel),提供了构建高性能肝细胞三明治夹层培养模型的可靠解决方案。TPCS®冻存的原代肝实质细胞涵盖多种物种,例如大鼠、小鼠、猴和犬,经过贴壁三明治夹层培养验证,确保高贴壁率和卓越的细胞质量,这些特性对构建稳定的三明治夹层培养模型及其后续应用至关重要。
为验证该优化系统的性能,我们采用CDF荧光探针检测胆小管形成及MRP2介导的CDF转运功能。实验结果显示,三明治夹层培养模型中的肝细胞能够形成密集的胆小管网络,并观察到明显的荧光CDF在胆小管中的累积,表明该系统能够有效重建肝细胞的极性和转运功能。
在评估TPCS®三明治夹层培养系统的药物代谢活性时,使用特异性底物探针测定I相和II相代谢酶的活性,结果显示,与传统的二维单层培养相比,三明治夹层培养显著提高了多种代谢酶的活性,进一步凸显了其在药物代谢和毒性研究中的应用潜力。
综上所述,利用尊龙凯时的原代肝实质细胞成功构建了SD大鼠肝细胞三明治模型,该模型展现了完整的胆小管结构并保持了优良的功能表现。与2D单层培养相比,三明治夹层培养模型在维持肝细胞代谢功能和整体活性方面更具优势,使其在药物筛选、毒理学研究和药物代谢研究中扮演了重要角色。尊龙凯时的这一技术不仅提高了研究的精确性,也为生物医药领域的发展注入了新的活力。